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蜀科高速冷凍離心機在DNA提取中的重要作用

更新時間:2017-10-12      點擊次數:3916

  DNA提取的生物樣(yang)品分離實(shi)驗,在基因工程和(he)(he)蛋白質工程等分子生(sheng)物學領域和(he)(he)司法鑒定(ding)領域應用廣。在DNA提取中,高速冷凍離心機發揮著重要的作用,因其中關鍵的一點是溫度的控制。
  以實驗為例,在細胞的細胞核中,DNA與蛋白質結合形成染色體,因此提取DNA時既要將蛋白質等物質除盡,又要盡可能保持DNA分子的完整性,即保持DNA帶不發生斷裂,無外源污染。實驗在4℃和常溫條件下分別進行。4℃條件下采用高速冷凍離心機,而常溫條件采用小型臺式高速離心機,實驗結果顯示,4℃條件提取的DNA條帶整齊無拖帶,而常溫提取的DNA有明顯的拖帶現象,表明前者的DNA片段完整無斷裂,未被污染,且分子大小相同,而后者的DNA有部分已斷裂。在本實驗采用的有機法中,由于酚類容易被氧化,產生醌、二羧酸等氧化物,可破壞中的磷酸二酯鍵,并引起DNA鏈的交聯,常溫條件下由于離心機轉子高速旋轉產生大量熱,加速了酚的氧化,并增加了血液中細胞釋放的內源酶的活性,導致部分基因組DNA降解。而在4℃條件下提取的DNA由于溫度低,酚不易被氧化,內源酶活性較低,因此能夠保證DNA的完整性。
  同(tong)理,對生物活性保留(liu)要(yao)求很苛刻(ke)的技術項目,離心萃(cui)取的溫(wen)度都需要(yao)嚴格符合(he)要(yao)求,超過溫度區間范圍會對活性酶的指標有影響或者溫度過低導致凝結。
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