前兩天小編給大(da)家講(jiang)解了臺式(shi)高速(su)離(li)心(xin)機密(mi)(mi)度(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)離心法和(he)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)介質(zhi)的回收，為了讓大(da)家(jia)對此問(wen)題認識更全面，今(jin)天給大(da)家(jia)科普下密(mi)(mi)度(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)溶(rong)液的配制(zhi)(zhi)方法。配置密(mi)(mi)度(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)溶(rong)液，一(yi)般(ban)情況下是先(xian)配制(zhi)(zhi)高濃(nong)度(du)(du)(du)儲備液，再用緩沖液稀(xi)釋到需要的濃(nong)度(du)(du)(du)，階梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)配制(zhi)(zhi)若干個不同密(mi)(mi)度(du)(du)(du)的溶(rong)液，連續(xu)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)一(yi)般(ban)配制(zhi)(zhi)兩種密(mi)(mi)度(du)(du)(du)的溶(rong)液，其中一(yi)種是梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)的大(da)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)，另一(yi)種是梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)的小密(mi)(mi)度(du)(du)(du)。

  用各種(zhong)離(li)心機轉(zhuan)子(zi)(zi)在(zai)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)介質(zhi)中分離(li)顆粒時，使(shi)用兩種(zhong)形(xing)式(shi)的梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)，即(ji)自形(xing)成(cheng)(cheng)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)和(he)預(yu)形(xing)成(cheng)(cheng)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。自形(xing)成(cheng)(cheng)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)是(shi)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)介質(zhi)在(zai)離(li)心場作用下(xia)顆粒重新(xin)分布(bu)，形(xing)成(cheng)(cheng)從頂部到(dao)底部逐(zhu)漸增加密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)的液柱(zhu)。預(yu)形(xing)成(cheng)(cheng)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)是(shi)指(zhi)在(zai)離(li)心之前，用梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)形(xing)成(cheng)(cheng)儀或人工的方法預(yu)先制備密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)柱(zhu)。按照梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)結(jie)構可分為不連續梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)（即(ji)階梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)）和(he)連續梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)兩種(zhong)類(lei)型。連續梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)又(you)有線性梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)、指(zhi)數梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)、對(dui)數梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)和(he)復合梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。有時為了(le)(le)速率區帶離(li)心分離(li)的方便，又(you)設(she)計了(le)(le)等(deng)動(dong)力梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)，為了(le)(le)防止(zhi)在(zai)區帶轉(zhuan)子(zi)(zi)中的徑(jing)向稀(xi)釋，設(she)計了(le)(le)等(deng)體積梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。配置密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)溶液需要(yao)注意很(hen)多事項。

  堿金(jin)屬鹽(yan)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)在(zai)4℃下(xia)可(ke)(ke)以長期保(bao)存，但含碘的(de)(de)(de)物質(zhi)(zhi)應避光保(bao)存，多元(yuan)醇易受微生(sheng)物污(wu)染，保(bao)存在(zai)-20℃使用時不(bu)方(fang)便。好臨(lin)時配置(zhi)。有(you)些(xie)(xie)使用冷凍離(li)心(xin)機進(jin)行(xing)離(li)心(xin)需要在(zai)無菌條件下(xia)進(jin)行(xing)，但高壓消(xiao)毒(du)對有(you)些(xie)(xie)梯度(du)(du)介質(zhi)(zhi)會帶來一些(xie)(xie)不(bu)利影響(xiang)，如引起Percoll顆粒不(bu)穩定，配制(zhi)時可(ke)(ke)只對稀釋劑(ji)進(jin)行(xing)消(xiao)毒(du)，碘化梯度(du)(du)介質(zhi)(zhi)中(zhong)只有(you)Metrizamide可(ke)(ke)以進(jin)行(xing)高壓消(xiao)毒(du)。溶(rong)(rong)解多糖是先給粉劑(ji)里(li)加(jia)入少許水攪拌，使之成(cheng)(cheng)為半透明的(de)(de)(de)糊狀(zhuang)，再稀釋到所需體積(ji)。如果直接把大量(liang)水或緩沖液(ye)(ye)加(jia)到多糖粉劑(ji)里(li)，會形成(cheng)(cheng)大量(liang)凝塊。可(ke)(ke)用比(bi)重(zhong)瓶或折射儀測定梯度(du)(du)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)的(de)(de)(de)密度(du)(du)和所有(you)介質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)密度(du)(du)分布，用下(xia)述方(fang)程能快速地根據折射率計算溶(rong)(rong)液(ye)(ye)的(de)(de)(de)密度(du)(du)：

ρ=An-B 
式中，A和B的值隨著梯度介質和溫度的變化而不同，如用0.8% NaCl、120mmol/L Tricine-NaOH配制的等滲Iodixanol梯度中，A=3.2984，B=3.3967。

儲(chu)存液與稀(xi)釋劑間通過混合(he)得到(dao)的溶液密度可用下式計算：

式中，D為所需密度；V為儲存液的體積；d為儲存液的密度；V1為稀釋液的體積；d1為稀釋液的密度。
  經過小編的講解，大家是否清楚了蜀科臺式高速離心機密(mi)度梯度溶液的配制方法，后續更多離心(xin)機(ji)知識(shi)請關注(zhu)蜀科公眾號：shukeyiqi，或者登陸(lu)我(wo)們的查看(kan)。